紫外可見分光光度計是一種常用的實(shí)驗(yàn)室儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)學(xué)和環(huán)境等領(lǐng)域。本文將介紹紫外可見分光光度計的基本原理、構(gòu)造和使用方法。
一、基本原理
利用樣品吸收光的特性來測量其濃度的儀器。在紫外可見區(qū)域,不同物質(zhì)對光的吸收程度不同。當(dāng)樣品通過光度計時,會通過一個具有單色性能的光源發(fā)出的一束光線照射到樣品上,樣品會吸收部分光線,使其透過樣品的光線減少。這部分被吸收的光線量可以通過檢測樣品前后光線強(qiáng)度的變化來計算出來。由此可以推算出樣品中某一特定物質(zhì)的濃度。
二、構(gòu)造
通常由以下三個部分組成:光源、單色器和檢測器。
1.光源:該光度計中通常采用氘燈或鎢燈作為光源。
2.單色器:單色器主要用來將光源發(fā)出的白光分離成一束具有單色性能的光線。單色器中通常采用光柵或棱鏡作為分離機(jī)構(gòu),通過旋轉(zhuǎn)單色器上的光柵或棱鏡,可以選擇一個特定的波長范圍。
3.檢測器:檢測器用于測量樣品前后光線強(qiáng)度的變化。常用的檢測器包括光電二極管和光電倍增管等。這些檢測器可以將光線轉(zhuǎn)化為電信號,并將其發(fā)送到計算機(jī)或數(shù)顯儀器上進(jìn)行顯示和記錄。
三、使用紫外可見分光光度計需要注意以下幾個方面:
1.樣品的制備:樣品需要被制備成透明均勻的溶液或懸浮液。如果樣品是固體,則需要先將其溶解或懸浮于適當(dāng)?shù)娜軇┲小?/span>
2.手動調(diào)節(jié)儀器:在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前,需要手動調(diào)節(jié)光源和單色器以選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL范圍,并校正零點(diǎn)(即在沒有樣品的情況下測量背景光強(qiáng)度)。
3.放入樣品:將制備好的樣品倒入光路中,并根據(jù)需要選擇適當(dāng)?shù)穆窂介L度。
4.記錄結(jié)果:記錄樣品前后的光線強(qiáng)度差值,并使用標(biāo)準(zhǔn)曲線或計算公式來計算樣品中某一特定物質(zhì)的濃度。